实验配方:
磷酸盐缓冲液 (PBS)
实验步骤:
用50 mM碳酸钠 (pH 9.6) 稀释BVP。
向每个孔中加入50 µL,并在4°C下孵育16-24小时。
吸出未结合的BVP,然后在室温下进行以下步骤。
加入100 µL封闭缓冲液 (PBS中含0.5% BSA),孵育1小时。
用100 µL PBS洗涤3次。
加入50 µL 1 µM的一抗,孵育1小时。
用100 µL PBS洗涤6次。
加入50 µL抗人IgG-HRP,孵育1小时。
用100 µL PBS洗涤6次。
加入50 µL TMB底物,孵育10-15分钟。
用50 µL 2M硫酸终止反应。
在450 nm处读取吸光度。
通过与未加入测试抗体的对照孔吸光度的标准化计算BVP得分。
存储条件: -80°C保存